Вагинальная цитология. Определение времени вязки у сук.
Вагинальная цитология проводится с целью определения стадии эстрального цикла, определения сроков вязки и родов, для определения отклонений в эстральном цикле, определения природы выделений из вульвы. К, сожалению, с помощью этого метода невозможно определить сроки овуляции.
Техника проведения.
Ватный тампон, пропитанный физиологическим раствором, вводится во влагалище. Необходимо избегать касания клитора, ямки клитора и кожи, так как в этих областях содержатся клетки, которые могут помешать интерпретировать результаты. Далее тампон аккуратно прокатывают по предметному стеклу, делая несколько продольных мазков.
 , |
Предметное стекло, по поверхности которого был прокатан ватный тампон извлеченный из влагалища суки. Видны два продольных мазка. |
Для окраски препаратов можно пользоваться различными красителями. Мы используем для окраски препаратов краситель Дифф- Квик, так же можно пользоваться метиленовым синим и др. красителями.
Перед тем как начать окраску препарата, лучше его высушить. Капля красителя помещается на область нахождения клеток и накрывается покровным стеклом.
Какие клетки мы можем увидеть?
Парабазальные клетки - имеют округлую или слегка овальную форму, небольшое количество цитоплазмы и большое ядро.
Промежуточные клетки - гладкие, округлые или овальные, имеют неровные очертания и содержащее везикулы ядро, которое меньше, чем ядро парабазальных клеток. Размер этих клеток весьма разнообразен. Они могут быть немного крупнее парабазальных, а могут превышать по величине парабазальные клетки в 2 раза.
Поверхностные клетки - это мертвые клеточные элементы, которые выстилают влагалище сук во время эструса. Это самые крупные из обнаруживаемых во влагалищных мазках клетки. Они имеют заостренную форму, угловатые контуры цитоплазмы и мелкие, сморщенные, частично лизированные ядра или вообще не содержат ядер.
Поверхностные промежуточные клетки - имеют относительно нормальное ядро, но в целом по внешнему виду являются типичными поверхностными клетками.
Безъядерные клетки - чешуйки - крупные, мертвые, неправильной формы клетки, не содержащие ядер. Они представляют собой конечную фазу отмирания, которая начинается уже в парабазальных клетках. Так же часто эти клетки называют "полностью ороговевшими" или "полностью кератинизированными клетками".
Метэстральные клетки - обычно крупнее промежуточных клеток. В их цитоплазме часто находят один или большее количество нейтрофилов. Метэстральные клетки, как правило, обнаруживаются в начале диэструса или в случаях вагинита. Очень редко такие клетки встречаются в начале проэструса.
 . |
Парабазальная клетка |
 . |
Поверхностная клетка с пикнотическим ядром |
 . |
Промежуточная клетка |
 . |
Поверхностная безъядерная клетка (клетка - чешуйка) |
 . |
Метэстальная клетка |
 . |
Поверхностная промежуточная клетка |
Цитологические изменения влагалища сук
на разных
стадиях эстрального цикла.
| Клетки/ Стадия цикла |
Проэструс |
Эструс |
Диэструс |
| Парабазальные клетки |
+ |
- |
+ |
| Промежуточные клетки |
+ |
редко |
+ |
| Поверхностно промежуточные клетки |
+/-
появляются ближе к концу |
+ |
+/- |
| Поверхностные клетки |
редко, чаще появляются в конце |
более 80-90 % |
редко |
| Эритроциты |
+ |
+/- |
+/- |
| Лейкоциты |
+ |
- |
++/+ |
Во время проэструса парабазальные, промежуточные и некоторые поверхностные клетки отторгаются.
Обнаруживаются эритроциты, лейкоциты и бактерии.
При приближении эструса отмечается значительное повышение эпителиальных клеток и снижение содержания лейкоцитов. Во время эструса преобладают поверхностные клетки (иногда они составляют более 90% отторгающихся эпителиальных клеток).
Могут обнаруживаться эритроциты и внеклеточные бактерии. Лейкоциты в период эструса отсутствуют, за исключением случаев, когда имеет место сопутствующий воспалительный процесс.
Диэструс сопровождается наличием резких изменений: парабазальные и промежуточные клетки превышают по количеству поверхностные клетки. Слои поверхностных клеток могут отмечаться в начале диэструса. Практически всегда снова появляются лейкоциты. Часто обнаруживаются эритроциты и бактерии.
Такие же изменения происходят во время эстрального цикла у кошек, но у них редко обнаруживают эритроциты и лейкоциты.
 . |
 . |
| Проэструс. Видно большое количество эритроцитов (маленькие красные точки) (х 10). |
Проэструс. Большое кол-во нейтрофилов, эритроцитов, появляются поверхностные клетки. (х 40). |
 . |
 . |
| Эструс. Более 80% поверхностных клеток (х 10). |
Эструс (х 40). |
 . |
 . |
| Диэструс. Поверхностные клетки составляют менее 20% (х 10). |
Диэструс (х 40). |
 . |
| Диэструс. Стрелкой указана метэстральная клетка (х 100). |
Подготовка собак к вязке.
1. Для вязки подбирайте только здоровых животных.
2. Определите первый день эструса. Начинайте в ранний период течки (на третий день проэструса). Наблюдайте каждый день за поведением суки (провоцируйте ее самцом) и /или проводите регулярное вагинальное цитологическое исследование. (Для более точного определения времени овуляции и дат вязки можно определять содержание прогестерона в сыворотке, приблизительно за 24-48 часов до предовуляционного выброса ЛГ концентрация прогестерона поднимается выше 1,0 нг/мл в типичных случаях спустя 2 дня (во время овуляции) концентрация прогестерона составляет 4-10 нг/мл)
3. Когда поверхностные клетки в мазках достигнут 80% от всего количества эпителиальных клеток, необходимо поместить суку с кобелем.
4. Вязку следует повторять до тех пор, пока сука не начнет отказываться от вязки (не всегда можно определить) и цитологическая картина будет соответствовать эструсу. Интервалы между вязками в среднем 3-4 дня, однако для каждого конкретного случая нужно подбирать свой режим вязок.
5. Обследование на беременность проводится через 21-30 дней. При отсутствии беременности определить содержание прогестерона в сыворотке для оценки овуляции и лютеиновой функции.
Для статьи были использованы материалы:
- Лабораторная диагностика в клинике мелких домашних животных. М. Уиллард, Г. Тведтен, Г. Торнвальд
- Эндокринология и репродукция собак и кошек. Э. Фелдмен, Р. Нелсон.
вернуться к списку статей
|
